血清游离甘油

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

xuè qīng yóu lí gān yóu

2 概述

血中脂肪酸的45%与甘油以酯化形成存在。

3 血清游离甘油医学检查

3.1 分类

血液生化检查 > 脂类测定

3.2 取材

血液

3.3 原理

酶法测定血清游离脂肪酸分三步反应反应式如下:

(1)

(2)

(3)

3.4 试剂

以Boehringer mannheim游离甘油测定试剂盒为例:

(1)缓冲液Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH调pH)。

(2)81mol/L ATP溶液:125mg ATP溶于2.5ml缓冲液Ⅰ中。

(3)10mmol/L MgCl2溶液

(4)10mmol/L pH6.5辅酶A溶液

(5)50g/L Triton X-100溶液。

(6)酰基辅酶A合成酶  8.4ku/L(用缓冲液Ⅰ配制)。

(7)2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)缓冲液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH调pH)。

(8)N-乙基顺丁烯二酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(9)4-氨基安替比林溶液,15mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(10)2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHB)溶液60mmol/L(用MES缓冲液配制)。

(11)过氧化物溶液,2000u/ml。

(12)1g/L NaN3溶液

(13)酰基辅酶A氧化酶溶液:约120u/ml(用缓冲液Ⅰ配制)。

3.5 操作方法

(1)混合试剂:

①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。

②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。

③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。

上述三种混合试剂4℃避光保存稳定3天。

(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。

(3)加入空白血清标本各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1

(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2

3.6 正常值

3~10岁:65~228μmol/L(0.6~2.1mg/dl);

>11岁: 33~185μmol/L(0.3~1.7mg/dl)。

3.7 临床意义

升高:甲状腺功能亢进慢性肾功能衰竭糖尿病肝硬化高血脂症肥胖

3.8 附注

血清游离脂肪酸浓度大于2mmol/L可适当稀释后再测。

3.9 相关疾病

肥胖     肝硬化     甲状腺功能亢进     慢性肾功能衰竭     糖尿病

编辑:banlang 审核:sun
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