4 α-茶酚醋酸酯酶染色的医学检查
4.1 检查名称
4.2 分类
血细胞化学染色
4.3 α-茶酚醋酸酯酶染色的测定原理
α-乙酸萘酚酯酶将乙酸萘酚水解,产和萘酚,再与重氮盐(如坚牢蓝B)反应,生成不溶性的有色(灰黑或棕黑色)沉淀,定位于胞浆中。
4.4 试剂
(1)作用液:1/20mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4)40ml,加10g/L α-乙酸萘酚(以50%丙酮作溶剂)0.8ml,充分振荡,直至最初产生的混浊物大部分消失为止,加重氮盐(坚牢蓝B或其他种均可)40.0mg,振荡,过滤后使用。
(2)1g/L甲基绿水溶液。
4.5 操作方法
(1)固定:新鲜涂片置10%甲醛生理盐水5min或甲醛蒸气固定5~10min。
(2)流水冲洗5min,晾干。
(3)放入作用液,37℃ 1h。
(4)水洗后,用甲基绿水溶液复染5min。
(5)水洗,干后镜检。
用氟化钠抑制试验作对照,在40ml作用液中加入氟化钠15mg,其余方法同上。两种方法染色后用油镜计数100或200个被检细胞,分别计算出抑制前和抑制后的阳性率和积分,按下列公式计算出抑制率:
4.6 正常值
原单核细胞、幼单核细胞、单核细胞、巨核细胞、血小板为阳性反应;各期粒细胞、幼红细胞、淋巴细胞、浆细胞为阴性反应。
4.7 化验结果临床意义
阳性可见于单核细胞白血病、组织细胞白血病、网状细胞肉瘤、粒细胞-单核细胞性白血病、红血病、红白血病、早幼粒细胞性白血病等的细胞。
4.8 附注
必要时,对α醋酸萘酚酯酶染色阳性反应的标本,加做氯化钠抑制试验。红血病、红白血病、早幼粒细胞性白血病不被氟化钠试验抑制,仍为阳性。