3 概述
MBP在少突胶质细胞内合成。由170个氨基酸残基组成,分子量为18000,内含丰富的脂质。蛋白质含量约占30%,MBP是神经组织的一种组成成分。神经组织损害后,几天内即释放出CSF中。故CSF中MBP浓度升高,可反映神经髓鞘完整性的破坏。
5 脑脊液结合型髓鞘碱性蛋白抗体的医学检查
5.1 检查名称
5.2 分类
5.3 化验取材
5.4 脑脊液结合型髓鞘碱性蛋白抗体的测定原理
ELISA的原理是基于抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体保持其免疫学活性,抗原或抗体的酶结合物既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应的结果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
5.5 试剂
ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。这些试剂的制备比较复杂,在临床检验中均采用商品的试剂盒,其中配有该项测定中所需的全部试剂,但国内某些商品中仅提供主要试剂,操作者需自作固相的包被和一些溶液的配制。目前国内常用的ELISA检验主要是以辣根过氧化物酶(HRP)为标记物的微孔板法,本文以此法为主,叙述其技术要点。
完整的ELISA试剂盒应包含以下各组分;①已包被抗原或抗体的固相载体。②酶标记的抗原或抗体(结合物)。③酶的底物。④阴性对照和阳性对照(定性测定),参考标准和控制血清(定量测定)。⑤结合物及标本的稀释液。⑥洗涤液。⑦酶反应终止液。
5.6 操作方法
使用ELISA操作法。
5.7 正常值
0.46±0.96μg/L。
5.8 化验结果临床意义
多发性硬化症、视神经脊髓炎、散发性脑炎、结核性脊髓蛛网膜炎、脑肿瘤、脊髓肿瘤、脑积水、颅部手术、感染性多发性神经根炎、亚急性联合变性、脑血栓、脑出血、老年前期痴呆等CSF中抗体合量升高。
恶化型多发性硬化症从FMBP与FMBPA增高为主,FMBP/BMBP比值升高;稳定型以BMBP及BMBPA升高占优势,FMBP/BMBP比值降低。
5.9 附注
ELISA为多反应、多试剂、多步骤的检验方法,必须严格按照要求细心谨慎操作,否则得不到准确的结果。