脑脊液环磷鸟苷

1 拼音

nǎo jǐ yè huán lín niǎo gān

2 英文参考

cerebrospinal fluid cyclophosphamide guanosine

3 概述

环鸟苷酸是由细胞内鸟苷三磷酸（GTP）经鸟苷酸环化酶催化所产生。目前认为环鸟苷酸和环腺苷酸是相互拮抗的物质，在正常生理状态下，组织或血浆中的环腺苷酸和环鸟苷酸浓度的比值保持相对恒定，在分析中往往同时测定这两种物质的浓度，两者比例失调是某些疾病发病机制的一项客观指标。

4 脑脊液环磷鸟苷的医学检查

4.1 检查名称

脑脊液环磷鸟苷

4.2 分类

体液和排泄物检查 > 脑脊液检查

4.3 化验取材

脑脊液

4.4 脑脊液环磷鸟苷的测定原理

cGMP是继cAMP之后1963年Price发现的另一种环核苷酸。其结构和cAMP基本相似，由鸟苷、核糖和磷酸所组成。测定原理也与cAMP相似，即样品经预处理，将样品和标准同时进行酰化反应，以改善抗体对待测物的亲和力，提高测定方法的灵敏度。样品和[³H]-ScGMP共同竞争性的与抗体结合，从标准剂量反应曲线计算出样品中cGMP浓度。

4.5 试剂

（1）抗血清：以ScGMP-BSA结合物免疫动物获得。与cAMP交叉反应为零，滴度为1∶12000。

（2）[³H]-cGMP：中国原子能研究院产品，比放射活性814GBq（22Ci）/mmol。4℃冰箱贮存。

（3）50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液：同[³H]-cAMP测定法。

（4）[³H]-ScGMP：取[³H]-cGMP 92.5kBq 2.5μci）加至带玻璃塞提取管中，加琥珀酸酐5mg，蒸馏水0.1ml。再加三乙胺10μl，即刻用力摇1～2min，加50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液10ml。临用前配制。

（5）标准cGMP液（8nmol/ml）：取AR级cGMP少许溶于双蒸馏水中。在紫外分光光度计260nm（1cm比色杯）测A值。按照cGMP260nm的A值除以11.7即得cGMPmmol/L。再以蒸馏水稀释8nmol/ml。

（6）标准cGMP（80pmol/瓶）：取标准cGMP液10μl加至5ml瓶中，放37℃干燥，加盖密封放4℃保存。临用前，取标准cGMP一瓶，加2ml 50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液溶解，为S₆。另取试管5只各加缓冲液0.5ml，从S₆中吸出0.5至S₅，依次倍比稀释，此系列标准浓度100μl中含有4，2，1，0.5，0.25，0.125pmol。

（7）闪烁液：同[³H]-标记cAMP测定法。

4.6 操作方法

（1）样品的采集和预处理：同[³H]-标记cAMP测定法。

（2）加液程序：取10mm×100mm玻璃试管，注明NSB、S₀、S_1～5和测定。按表1程序加入样品和试剂。

（3）加[³H]-ScGMP和抗血清后，混匀，放4℃反应2.5h，每管补加冷50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液1ml，混合匀充。

（4）取硝酸纤维膜（上海化工研究院产品）浸于50mmol/L pH6.2醋酸盐缓冲液中2h，然后放置在专用滤器上。将反应液滴加至滤膜上抽滤，再用1ml相同缓冲液洗反应管2次，亦加至滤膜上洗涤和抽滤。

（5）将滤膜放80℃30min干燥。另取[³H]-ScGMP50μl滴至另一张干燥滤膜上，作为总计数（T）。

（6）将膜放至预先加5ml闪烁液的瓶中，放2～3h后测放射性。

（7）零标准净计数B₀，标准管净计数为B，以B₀/B为纵坐标，标准管cGMP的Pmol为横坐标，在普通坐标纸作图，在Y轴截距1处得出一条直线。依样品管B₀/B值，在标准剂量反应图上得出相对应cGMP的值。再乘5得nmol/L。

4.7 正常值

1.7～3.1nmol/L。

4.8 化验结果临床意义

（1）升高：急性心肌梗死、甲状腺功能亢进症、慢性肾小球肾炎（慢性肾炎）。

（2）降低：甲状腺功能减退症。

4.9 附注

cAMPT和cGMP参与多种生理功能和物质代谢过程，很多生物性物质如激素、神经递质、药物及毒素等，在体内作用过程中，均使细胞内cAMP与cGMP的水平发生变化。

4.10 相关疾病

急性心肌梗死、甲状腺功能亢进症、慢性肾小球肾炎、甲状腺功能减退症