精氨酰琥珀酸裂解酶

酶类测定 血液生化检查 化验及医学检查

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。
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1 拼音

jīng ān xiān hǔ pò suān liè jiě méi

2 英文参考

arginosuccinate lyase

3 概述

精氨酰琥珀酸裂解酶尿素合成代谢过程中产生的一种酶,其在肝中含量最丰富,少量存在于小肠肾脏。当肝脏发生病变时,精氨酰琥珀酸裂解酶即可随肝细胞破坏进入血液。目前认为诊断肝炎时测定精氨酰琥珀酸裂解酶的意义与转氨酶相当。

5 精氨酰琥珀酸裂解酶医学检查

5.1 检查名称

精氨酰琥珀酸裂解酶

5.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

5.3 化验取材

血液

5.4 精氨酰琥珀酸裂解酶的测定原理

以精氨酰琥珀酸作基质,在一定的反应条件下,血清中的精氨酰琥珀酸裂解酶作用基质,产生精氨酸和反丁烯乙酸。加入三氯乙酸,停止酶反应,同时沉淀蛋白,测定无蛋白滤液中精氨酸的量,来测知酶的活力。

5.5 试剂

(1)磷酸盐-EDTA缓冲液(0.1mol.L磷酸盐,0.1mol/L EDTA,pH7.0):取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)31.2g,和乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)58.4g,加蒸馏水约500ml溶解,用2.5mol/L氢氧化钠液校正pH至7.0加蒸馏水释至1000ml(存于冰箱中)。

(2)基质液(精氨酰琥珀酸4mmol/L):称取精氨酰琥珀酸钡盐(分子量493.7)50mg,溶于4ml蒸馏水中,加0.35mol/L硫酸钠1ml,混匀后,放置1/2h后离心,吸取上清液。每ml上清液加4ml磷酸盐-EDTA缓冲液,混匀即可使用(冰箱存1周)。

(3)20g/L胸腺嘧啶溶液:称取胸腺嘧啶2g,用2.5mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至100ml(存于冰箱中)。

(4)0.6g/L 2,4-二氯萘酚溶液:称取2,4-二氯萘酚 60mg,加95%乙醇溶液溶解,并稀释至100ml(存于冰箱中)。

(5)胸腺嘧啶-2,4-二氯萘酚溶液取“3”和“4”等量混合(临用现配)。

(6)次氯酸钠溶液:取安替福民(有效氯5.25%)60ml,加蒸馏水至500ml(存于冰箱中)。

(7)2.5mol/L氢氧化钠溶液

(8)0.6mol/L三氯乙酸溶液

(9)精氨酸标准液(1mmol/L):称取L-精氨酸17.42mg,于100ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度(存在于冰箱中)。

5.6 操作方法

按表1操作。

每加一试剂混匀后再加第二试剂,放入冰浴中15min后用515nm波长立即比色,用空白管调吸光度至“0”点,读取测定管的吸光度,在标准曲线上查出ASAL活力单位。

放入冰浴中15min,用515nm波长比色,用1号管调吸光度至“0”点,分别读取各管吸光度,与其相应浓度制图,绘成标准曲线。

5.7 正常值

(1)酶速率法(37℃):0~50U/L

(2)比色法: 0.2~5.3U

5.8 化验结果临床意义

精氨酸琥珀裂解酶,是尿素合成代谢中的一种酶,肝脏中含量丰富。当肝脏发生病变时,随肝细胞破坏ASAL就进入血液,所以,此酶测定较转氨酶测定对肝脏疾病有较高的特异性。有助于诊断急慢性肝炎,尤其是HBsAg阳性而ALT升高不显著的病人,作出早期诊断有较大价值。

5.9 附注

(1)此方法温度高,显色差;温度低,显色好。因此,应保持在一定低温度下操作,如无冰浴条件,可在20℃以下室温下操作,但重复性差,每次应作标准管计算结果。

(2)比色前应用力振摇,要在半小时内比色完毕,否则将影响测定结果。

(3)此酶低于pH6.4,高于pH70,活力都下降,所以,每次基质液应保持pH70。

编辑:banlang 审核:sun
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